Oddelenie laboratórnej medicíny, Ľudová nemocnica autonómnej oblasti Guangxi Zhuang, Nanning, Čína
Oddelenie laboratórnej medicíny, Pridružená nemocnica Shandongskej univerzity tradičnej čínskej medicíny, Jinan
Huang Huayi, School of Laboratory Medicine, Youjiang National Medical University, Baise, Guangxi, 533000, Mindray North America, Mahwah, New Jersey, 07430, USA.
Oddelenie laboratórnej medicíny, Ľudová nemocnica autonómnej oblasti Guangxi Zhuang, Nanning, Čína
Oddelenie laboratórnej medicíny, Pridružená nemocnica Shandongskej univerzity tradičnej čínskej medicíny, Jinan
Huang Huayi, School of Laboratory Medicine, Youjiang National Medical University, Baise, Guangxi, 533000, Mindray North America, Mahwah, New Jersey, 07430, USA.
Pomocou nižšie uvedeného odkazu môžete zdieľať plnú textovú verziu tohto článku so svojimi priateľmi a kolegami.Uč sa viac.
Aby sme lepšie pochopili patologické zmeny COVID-19, napomáha to klinickému manažmentu ochorenia a príprave na vlnu podobných pandémií v budúcnosti.
Retrospektívne boli analyzované hematologické parametre 52 pacientov s COVID-19 prijatých do určených nemocníc.Údaje sa analyzovali pomocou štatistického softvéru SPSS.
Pred liečbou boli podskupiny T buniek, celkové lymfocyty, šírka distribúcie červených krviniek (RDW), eozinofily a bazofily významne nižšie ako po liečbe, zatiaľ čo ukazovatele zápalu neutrofilov, neutrofilov a lymfocytov pomer (NLR) a C β-reaktívny proteín ( Hladiny CRP, ako aj červených krviniek (RBC) a hemoglobínu sa po liečbe výrazne znížili.Podskupiny T buniek, celkové lymfocyty a bazofily u ťažkých a kriticky chorých pacientov boli významne nižšie ako u stredne ťažkých pacientov.Neutrofily, NLR, eozinofily, prokalcitonín (PCT) a CRP sú významne vyššie u ťažkých a kriticky chorých pacientov ako u stredne ťažkých pacientov.CD3+, CD8+, celkové lymfocyty, krvné doštičky a bazofily u pacientov nad 50 rokov sú nižšie ako u pacientov mladších ako 50 rokov, zatiaľ čo neutrofily, NLR, CRP, RDW u pacientov nad 50 rokov sú vyššie ako u pacientov mladších ako 50 rokov.U ťažkých a kriticky chorých pacientov existuje pozitívna korelácia medzi protrombínovým časom (PT), alanínaminotransferázou (ALT) a aspartátaminotransferázou (AST).
Podskupiny T buniek, počet lymfocytov, RDW, neutrofily, eozinofily, NLR, CRP, PT, ALT a AST sú dôležitými ukazovateľmi v manažmente, najmä u ťažkých a kriticky chorých pacientov s COVID-19.
Pandémia koronavírusovej choroby (COVID-19) z roku 2019 spôsobená novým typom koronavírusu vypukla v decembri 2019 a rýchlo sa rozšírila po celom svete.1-3 Na začiatku prepuknutia sa klinická pozornosť sústredila na prejavy a epidemiológiu v kombinácii s počítačovou tomografiou na zobrazenie pacientov 4 a 5 a následne diagnostikovaných s pozitívnymi výsledkami amplifikácie nukleotidov.V rôznych orgánoch sa však neskôr našli rôzne patologické poranenia.6-9 Čoraz viac dôkazov ukazuje, že patofyziologické zmeny COVID-19 sú komplikovanejšie.Vírusový útok spôsobuje poškodenie viacerých orgánov a imunitný systém reaguje prehnane.Pozorovalo sa zvýšenie sérových a alveolárnych cytokínov a proteínov zápalovej odpovede7, 10-12 a u kriticky chorých pacientov sa zistila lymfopénia a abnormálne podskupiny T buniek.13, 14 Uvádza sa, že pomer neutrofilov k lymfocytom sa stal užitočným ukazovateľom na rozlíšenie malígnych a benígnych uzlín štítnej žľazy v klinickej praxi.15 NLR môže tiež pomôcť odlíšiť pacientov s ulceróznou kolitídou od zdravých kontrol.16 Hrá tiež úlohu pri tyreoiditíde a spája sa s cukrovkou 2. typu.17, 18 RDW je marker erytrocytózy.Štúdie zistili, že pomáha rozlíšiť uzliny štítnej žľazy, diagnostikovať reumatoidnú artritídu, ochorenie bedrových platničiek a tyreoiditídu.19-21 CRP je univerzálny prediktor zápalu a bol študovaný v mnohých prípadoch.22 Nedávno sa zistilo, že NLR, RDW a CRP sa podieľajú aj na COVID-19 a zohrávajú dôležitú úlohu pri diagnostike a prognóze ochorenia.11, 14, 23-25 Preto sú výsledky laboratórnych testov dôležité pre hodnotenie stavu pacienta a rozhodovanie o liečbe.Retrospektívne sme analyzovali laboratórne parametre 52 pacientov s COVID-19, ktorí boli hospitalizovaní v určených nemocniciach v Južnej Číne podľa ich pred a po liečbe, závažnosti a veku, aby sme ďalej porozumeli patologickým zmenám ochorenia a pomohli budúcemu klinickému manažmentu. COVID-19.
Táto štúdia vykonala retrospektívnu analýzu 52 pacientov s COVID-19 prijatých do určenej nemocnice Nanning Fourth Hospital od 24. januára 2020 do 2. marca 2020. Spomedzi nich bolo 45 stredne chorých a 5 kriticky chorých.Napríklad vek sa pohybuje od 3 mesiacov do 85 rokov.Z hľadiska pohlavia to bolo 27 mužov a 25 žien.Pacient má príznaky ako horúčka, suchý kašeľ, únava, bolesť hlavy, dýchavičnosť, upchatý nos, nádcha, bolesť hrdla, bolesť svalov, hnačka a myalgia.Počítačová tomografia ukázala, že pľúca boli nerovnomerné alebo brúsené sklo, čo naznačuje zápal pľúc.Diagnostikujte podľa 7. vydania čínskych pokynov na diagnostiku a liečbu COVID-19.Potvrdené detekciou vírusových nukleotidov qPCR v reálnom čase.Podľa diagnostických kritérií boli pacienti rozdelení do stredne ťažkých, ťažkých a kritických skupín.V stredne ťažkých prípadoch sa u pacienta rozvinie horúčka a respiračný syndróm a zobrazovacie nálezy ukazujú obrazce zápalu pľúc.Ak pacient spĺňa ktorékoľvek z nasledujúcich kritérií, diagnóza je závažná: (a) respiračná tieseň (rýchlosť dýchania ≥30 dychov/min);(b) saturácia kyslíka v krvi v pokoji ≤ 93 %;(c) arteriálny tlak kyslíka (PO2))/inspiračná frakcia O2 (Fi O2) ≤300 mm Hg (1 mm Hg = 0,133 kPa).Ak pacient spĺňa niektoré z nasledujúcich kritérií, diagnóza je vážna: (a) respiračné zlyhanie, ktoré si vyžaduje mechanickú ventiláciu;b) šok;c) zlyhanie iného orgánu, ktoré si vyžaduje liečbu na jednotke intenzívnej starostlivosti (JIS).Podľa vyššie uvedených kritérií bolo 52 pacientov diagnostikovaných ako ťažko chorí v 2 prípadoch, ťažko chorí v 5 prípadoch a stredne ťažko chorí v 45 prípadoch.
Všetci pacienti, vrátane stredne ťažkých, ťažkých a kriticky chorých pacientov, sú liečení v súlade s nasledujúcimi základnými postupmi: (a) Všeobecná adjuvantná terapia;(b) Antivírusová terapia: lopinavir/ritonavir a a-interferón;(c) Dávkovanie receptúry tradičnej čínskej medicíny sa môže upraviť podľa stavu pacienta.
Táto štúdia bola schválená Revíznou komisiou Výskumného ústavu štvrtej nemocnice Nanning a bola použitá na zber informácií o pacientoch.
Hematologická analýza periférnej krvi: rutinná hematologická analýza periférnej krvi sa vykonáva na hematologickom analyzátore Mindray BC-6900 (Mindray) a hematologickom analyzátore Sysmex XN 9000 (Sysmex).Vzorka krvi s antikoagulantom kyseliny etyléndiamíntetraoctovej (EDTA) nalačno bola odobratá ráno po prijatí pacienta do nemocnice.Hodnotenie konzistencie medzi vyššie uvedenými dvoma analyzátormi krvi bolo overené v súlade s laboratórnymi postupmi kontroly kvality.Pri hematologickej analýze sa získa počet a diferenciácia bielych krviniek (WBC), červených krviniek (RBC) a index spolu s bodovými grafmi a histogramami.
Prietoková cytometria subpopulácií T lymfocytov: BD (Becton, Dickinson and Company) Prietokový cytometer FACSCalibur sa použil na analýzu prietokovou cytometriou na analýzu subpopulácií T buniek.Analyzujte údaje pomocou softvéru MultiSET.Meranie sa uskutočnilo v súlade so štandardnými pracovnými postupmi a pokynmi výrobcu.Pomocou skúmavky na odber EDTA antikoagulovanej krvi odoberte 2 ml venóznej krvi.Jemne premiešajte vzorku niekoľkonásobným otočením skúmavky, aby ste zabránili kondenzácii.Po odobratí vzorky sa odošle do laboratória a analyzuje sa do 6 hodín pri izbovej teplote.
Imunofluorescenčná analýza: C-reaktívny proteín (CRP) a prokalcitonín (PCT) sa analyzovali ihneď po dokončení analýzy pomocou krvných vzoriek analyzovaných hematológiou a analyzovali sa na imunofluorescenčnom analyzátore FS-112 (Wondfo Biotech Co., LTD.) na analýzu.) Dodržujte pokyny výrobcu a štandardy laboratórnych postupov.
Analyzujte sérovú alanínaminotransferázu (ALT) a aspartátaminotransferázu (AST) na chemickom analyzátore HITACHI LABOSPECT008AS (HITACHI).Protrombínový čas (PT) sa analyzoval na analyzátore STAGO STA-R Evolution (Diagnostica Stago).
Kvantitatívna polymerázová reťazová reakcia s reverznou transkripciou (RT-qPCR): Na vykonanie RT-qPCR na detekciu SARS-CoV-2 použite šablóny RNA izolované z nazofaryngeálnych výterov alebo sekrétov dolných dýchacích ciest.Nukleové kyseliny boli separované na platforme automatickej separácie nukleových kyselín SSNP-2000A (Bioperfectus Technologies).Detekčnú súpravu poskytli Sun Yat-sen University Daan Gene Co., Ltd. a Shanghai BioGerm Medical Biotechnology Co., Ltd. Tepelný cyklus sa uskutočnil na tepelnom cyklovači ABI 7500 (Applied Biosystems).Výsledky vírusových nukleozidových testov sú definované ako pozitívne alebo negatívne.
Na analýzu údajov bol použitý softvér SPSS verzie 18.0;Použil sa párový t-test, nezávislý výberový t-test alebo Mann-Whitney U test a hodnota P <,05 sa považovala za významnú.
Päť kriticky chorých pacientov a dvaja kriticky chorí pacienti boli starší ako pacienti v stredne ťažkej skupine (69,3 vs. 40,4).Podrobné informácie o 5 kriticky chorých a 2 kriticky chorých pacientoch sú uvedené v tabuľkách 1A a B. Ťažko a kriticky chorí pacienti majú zvyčajne nízke podskupiny T buniek a celkový počet lymfocytov, ale počet bielych krviniek je zhruba normálny, s výnimkou pacientov so zvýšenými bielymi krvinkami (11,5 × 109/l).Neutrofily a monocyty sú tiež zvyčajne vysoké.Hodnoty PCT, ALT, AST a PT v sére 2 kriticky chorých pacientov a 1 kriticky chorého pacienta boli vysoké a PT, ALT, AST 1 kriticky chorého pacienta a 2 kriticky chorých pacientov pozitívne korelovali.Takmer všetkých 7 pacientov malo vysoké hodnoty CRP.Eozinofily (EOS) a bazofily (BASO) majú tendenciu byť nízke u kriticky chorých a kriticky chorých pacientov (tabuľka 1A a B).Tabuľka 1 uvádza popis normálneho rozsahu hematologických parametrov v čínskej dospelej populácii.
Štatistická analýza ukázala, že pred liečbou boli CD3+, CD4+, CD8+ T bunky, celkové lymfocyty, distribučná šírka červených krviniek (RDW), eozinofily a bazofily významne nižšie ako po liečbe (P = 0,000, 000, 000, 0,012, . 04, 0,000 a 0,001).Zápalové indikátory neutrofily, pomer neutrofil/lymfocyty (NLR) a CRP pred liečbou boli významne vyššie ako po liečbe (P = 0,004, 0,011 a 0,017, v uvedenom poradí).Hb a RBC sa po liečbe významne znížili (P = 0,032, 0,026).PLT sa po liečbe zvýšil, ale nebol významný (P = 0,183) (tabuľka 2).
Podskupiny T buniek (CD3+, CD4+, CD8+), celkové lymfocyty a bazofily u pacientov s ťažkým a kritickým ochorením boli signifikantne nižšie ako u stredne ťažkých pacientov (P = 0,025, 0,048, 0,027, 0,006 a 0,046).Hladiny neutrofilov, NLR, PCT a CRP u ťažkých a kriticky chorých pacientov boli významne vyššie ako u stredne ťažkých pacientov (P = 0,005, 0,002, 0,049 a 0,002, v uvedenom poradí).Ťažko a kriticky chorí pacienti mali nižšiu PLT ako stredne závažní pacienti;rozdiel však nebol štatisticky významný (tabuľka 3).
CD3+, CD8+, celkové lymfocyty, krvné doštičky a bazofily u pacientov starších ako 50 rokov boli významne nižšie ako u pacientov mladších ako 50 rokov (P = 0,049, 0,018, 0,019, 0,010 a 0,039, v uvedenom poradí), zatiaľ čo u pacientov nad 50 rokov 50-roční pacienti Neutrofily, pomer NLR, hladiny CRP a RDW boli významne vyššie ako u pacientov mladších ako 50 rokov (P = 0,0191, 0,015, 0,009 a 0,010, v tomto poradí) (tabuľka 4).
COVID-19 je spôsobený infekciou koronavírusom SARS-CoV-2, ktorý sa prvýkrát objavil vo Wu-chane v Číne v decembri 2019. Prepuknutie SARS-CoV-2 sa potom rýchlo rozšírilo a viedlo ku globálnej pandémii.1-3 Vzhľadom na obmedzené znalosti o epidemiológii a patológii vírusu je úmrtnosť na začiatku prepuknutia vysoká.Hoci neexistujú žiadne antivírusové lieky, následný manažment a liečba COVID-19 sa výrazne zlepšila.To platí najmä v Číne, keď sa adjuvantné terapie kombinujú s tradičnou čínskou medicínou na liečbu skorých a stredne ťažkých prípadov.26 pacientom s COVID-19 prospelo lepšie pochopenie patologických zmien a laboratórnych parametrov ochorenia.choroba.Odvtedy úmrtnosť klesá.V tejto správe neboli žiadne úmrtia medzi 52 analyzovanými prípadmi, vrátane 7 ťažkých a kriticky chorých pacientov (tabuľka 1A a B).
Klinické pozorovania zistili, že väčšina pacientov s COVID-19 má znížené lymfocyty a subpopulácie T buniek, čo súvisí so závažnosťou ochorenia.13, 27 V tejto správe sa zistilo, že CD3+, CD4+, CD8+ T bunky, celkové lymfocyty, RDW pred liečbou, eozinofily a bazofily boli významne nižšie ako po liečbe (P = 0,000, 0,000, 0,000, 0,012, 0,04, 0,000 a 0,001).Naše výsledky sú podobné predchádzajúcim správam.Tieto správy majú klinický význam pri monitorovaní závažnosti COVID-19.8, 13, 23-25, 27, zatiaľ čo zápalové indikátory neutrofily, pomer neutrofilov/lymfocytov (NLR ) a CRP po predbežnej liečbe než po liečbe (P = 0,004, . 011 a .017), ktoré boli zaznamenané a hlásené už predtým u pacientov s COVID-19.Preto sa tieto parametre považujú za užitočné ukazovatele na liečbu COVID-19.8.Po liečbe bolo 11 hemoglobínu a červených krviniek významne znížených (P = 0,032, 0,026), čo naznačuje, že pacient mal počas liečby anémiu.Po liečbe bolo pozorované zvýšenie PLT, ale nebolo významné (P = 0,183) (tabuľka 2).Predpokladá sa, že pokles lymfocytov a subpopulácií T buniek súvisí s bunkovou depléciou a apoptózou, keď sa hromadia v zápalových miestach, ktoré bojujú s vírusom.Alebo mohli byť skonzumované nadmernou sekréciou cytokínov a zápalových proteínov.8, 14, 27-30 Ak sú podskupiny lymfocytov a T buniek trvalo nízke a pomer CD4+/CD8+ je vysoký, prognóza je zlá.29 Podľa nášho pozorovania sa podskupiny lymfocytov a T buniek po liečbe zotavili a všetkých 52 prípadov bolo vyliečených (tabuľka 1).Vysoké hladiny neutrofilov, NLR a CRP boli pozorované pred liečbou a potom sa významne znížili po liečbe (P = 0,004, 0,011 a 0,017, v tomto poradí) (tabuľka 2).Funkcia podskupín T buniek pri infekcii a imunitnej odpovedi bola už skôr opísaná.29, 31-34
Keďže počet ťažko a kriticky chorých pacientov je príliš malý, nevykonali sme štatistickú analýzu parametrov medzi ťažkými a kriticky chorými pacientmi a stredne ťažkými pacientmi.Podskupiny T buniek (CD3+, CD4+, CD8+) a celkový počet lymfocytov u pacientov s ťažkým a kritickým ochorením sú výrazne nižšie ako u pacientov so stredne ťažkým priebehom.Hladiny neutrofilov, NLR, PCT a CRP u ťažkých a kriticky chorých pacientov boli signifikantne vyššie ako u stredne ťažkých pacientov (P = 0,005, 0,002, 0,049 a 0,002, v tomto poradí) (tabuľka 3).Zmeny laboratórnych parametrov súvisia so závažnosťou ochorenia COVID-19.35.36 Príčina bazofílie je nejasná;môže to byť spôsobené konzumáciou jedla počas boja proti vírusu v mieste infekcie podobne ako lymfocyty.35 Štúdia zistila, že pacienti s ťažkým COVID-19 mali tiež znížené eozinofily;14 Naše údaje však nepreukázali, že tento jav môže byť spôsobený malým počtom závažných a kritických prípadov pozorovaných v štúdii.
Je zaujímavé, že sme zistili, že u ťažkých a kriticky chorých pacientov existuje pozitívna korelácia medzi hodnotami PT, ALT a AST, čo naznačuje, že pri napadnutí vírusom došlo k viacnásobnému poškodeniu orgánov, ako je uvedené v iných pozorovaniach.37 Preto môžu byť novými užitočnými parametrami na hodnotenie odpovede a prognózy liečby COVID-19.
Ďalšia analýza ukázala, že CD3+, CD8+, celkové lymfocyty, krvné doštičky a bazofily u pacientov starších ako 50 rokov boli významne nižšie ako u pacientov mladších ako 50 rokov (P = P = 0,049, 0,018, 0,019, 0,010 a. 039, v uvedenom poradí), zatiaľ čo hladiny neutrofilov, NLR, CRP a RBC RDW u pacientov nad 50 rokov boli významne vyššie ako u pacientov mladších ako 50 rokov (P = 0,0191, 0,015, 0,009 a 0,010 v uvedenom poradí) (tabuľka 4).Tieto výsledky sú podobné predchádzajúcim správam.14, 28, 29, 38-41 Pokles subpopulácií T buniek a vysoké pomery CD4+/CD8+ T buniek súvisia so závažnosťou ochorenia;staršie prípady bývajú závažnejšie;preto bude viac lymfocytov spotrebovaných v imunitnej odpovedi alebo vážne poškodené.Podobne vyšší RBC RDW naznačuje, že u týchto pacientov sa vyvinula anémia.
Výsledky nášho výskumu ďalej potvrdzujú, že hematologické parametre majú veľký význam pre lepšie pochopenie klinicko-patologických zmien pacientov s COVID-19 a pre zlepšenie vedenia liečby a prognózy.
Liang Juanying a Nong Shaoyun zhromaždili údaje a klinické informácie;Jiang Liejun a Chi Xiaowei vykonali analýzu údajov;Dewu Bi, Jun Cao, Lida Mo a Xiaolu Luo vykonali rutinnú analýzu;Huang Huayi bol zodpovedný za koncepciu a písanie.
Pokyny na obnovenie hesla nájdete vo svojom e-maile.Ak nedostanete e-mail do 10 minút, vaša e-mailová adresa nemusí byť zaregistrovaná a možno si budete musieť vytvoriť nový účet Wiley Online Library.
Ak sa adresa zhoduje s existujúcim účtom, dostanete e-mail s pokynmi na získanie používateľského mena
Čas odoslania: 22. júla 2021